Оценка токсикологических свойств продуктов растворения коллагена

Для вычисления к и b использовали расчетную таблицу 8. В первом помещали отобранные значения хi (десятичный логарифм концентрации lgC). Значения десятичных логарифмов концентрации (lgC) исследуемых водных вытяжек из ПРК определяли по калькулятору. В третьем - соответствующие им значения пробитов уi, четвертый и пятый столбцы рассчитывали:

Таблица 8 – Расчетная таблица

Продолжение таблицы 8

Пример расчета ЛКР50-96 на примере водной вытяжки из ПРК на основе курунговой закваски, культивированной на творожной сыворотке (2*).

Вычисляли искомые параметры к и b, по формулам (6), (7) при n = 4:

Искомое уравнение регрессии по формуле (5): у = 0,859х + 3,267.

Определяли значение х, соответствующее 50%-ной гибели дафний (у=5), по формуле (8):

,                                                          (8)

Полученный логарифм процентной концентрации исследуемой водной вытяжки из ПРК (2*) переводили в процентную концентрацию lgC50 = 2,017, что соответствует процентной концентрации 103,992%, ЛКР50-96 = 0,662.

Таким образом, установили, что 103,992 %-ная концентрация исследуемой водной вытяжки из ПРК (2*), или разбавление в 0,662 раза (100%/103,992%), вызывает 50%-ную гибель тест-объектов за 96 часов (ЛКР50-96 = 0,662) [39].

В соответствии с приказом МПР РФ от 15 июня 2001 г. № 511 «Об утверждении Критериев отнесения опасных отходов к классу опасности для окружающей среды» существуют 5 классов опасности (таблица 9), по которым были соотнесены полученные результаты [40].

Таблица 9 – Определение класса опасности

Таблица 10 – Результаты расчета ЛКР50-96 водных вытяжек ПРК

Полученные результаты, показали, что ПРК на основе уксусной кислоты; курунговой закваски, культивированной на творожной сыворотке и кефирных грибков, культивированных на молоке, относятся к V классу опасности. Водная вытяжка ПРК на основе кефирных грибков, культивированных на сыворотке и курунговой закваски, культивированной на молоке, относятся к lV классу опасности.

2.2.6 Процедура биотестирования на лабораторной культуре зеленых протококковых водорослях Scenedesmus quadricauda

Для биотестирования использовали альгологически чистую культуру водорослей Scenedesmus quadricauda, находящуюся в экспоненциальной стадии роста (через 3 - 5 суток после пересева). Для поддержания экспоненциальной стадии роста водорослей пересев осуществляют регулярно 1 раз в 7 суток.

Перед началом эксперимента исходную культуру водорослей (3 суточную) сгущали до образования суспензии путем взбалтывания и определяли исходную численность клеток суспензии, обеспечивая нужную плотность клеток при посеве в начале эксперимента.

После пересева и тщательного перемешивания водоросли в контрольных и испытуемых колбах перед началом эксперимента подсчитывали в камере Горяева.

Численность водорослей в начале биотестирования составила в каждой колбе 19 тыс. кл./см³.

Для определения численности клеток водорослей камеру Горяева предварительно накрывали покровным стеклом. После чего перемешивали в колбе водоросли и затем пипеткой наносили по одной капле произвольного объема на верхней и нижний края покрывного стекла. После того, как камера Горяева заполнилась водорослевой культурой, ее помещали под объектив микроскопа и подсчитывали число клеток в 25 больших квадратах, а затем по формуле (4) определяли количество клеток водорослей в см³ раствора:

,                                                       (9)