Качественная и количественная реакция на аминокислоты. Изучение явлений диализа

Практическая работа № 2

Качественная и количественная реакция на аминокислоты.

Изучение явлений диализа

Цель работы- познакомиться  с качественной реакцией на аминокислоты, содержащие серу , а также с реакцией  количественного определения аминокислот  с помощью нингидрина , изучить  явления диализа и определения  вязкости нативного и денатурированного  белка.

Материалы и оборудование: яичный альбумин, раствор ацетата  свинца, раствор сульфата аммония , раствор хлорида бария ,реактив  Несслера ,пробирки ,целлофановая плёнка, 1% раствор нинигидрина в ацетоне.

Ход работы :

1. В первой пробирке смешиваем 2 мл. раствора желатина ,2 мл. 20% раствора раствора КОН , 2 мл. раствора ацетата свинца .
2. Во второй пробирке смешать 2 мл. раствора яичного альбумина , 2 мл.20% раствора КОН и 2 мл. ацетата свинца.
3. Нагреваем обе пробирки на водяной бане.
4. В другой пробирке смешиваем 2 мл. раствора белка с 2 мл.1% раствора нингидрина на ацетоне.
5. Содержимое пробирки нагреваем на водяной бане при 90 °С.                       
6. В пробирку с раствором яичного альбумина прибавляем раствор (NH4)2SO4
7. Пробирку закрываем целлофановой плёнкой ,зажимаем в штативе в перевёрнутом виде и помещаем в стакан с дистиллированной водой.
8. Через 30 минут с содержимым пробирки и стакана проводят качественную реакцию на белок ,на ионы NH4 и на ионы SO4( c  BaCl2).

 

 

 

Таблица 2.1 Результаты качественных реакций на аминокислоты

Название реакции	Реагент	Изменение цвета
р. на серосодержащии аминокислоты	желатин ,KOH , ацетат свинца	с белого на бесцветный
	KOH, ацетат свинца	с белого на бесцветный
р. с нингидрином	Нингидрид на ацетоне	с желтого на пурпурный

 

Рисунок 2. 1. Протекание реакции  с нингидридом

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Изучение диализа

 Таблица 2.2 Результаты  диализа

Название реакции	Реагент	Изменение цвета
С дистиллированной водой	КОН, SO4	c прозрачного на голубоватый цвет
	реактив Несслера	с прозрачного на мутный рыжий цвет с осадком
	BaCl2	c прозрачного на мутный раствор
Р-р  яичный альбумина в р-ре (NH2)2SO4	KOH, SO4	c прозрачного на голубоватый цвет
	реактив Несслера	с прозрачного на оранжевый  раствор с образованием осадка на дне
	BaCl2	с прозрачного на белый

 

Вывод: Познакомились  с  качественной реакцией на аминокислоты, содержащие серу , а также с реакцией  количественного определения аминокислот  с помощью нингидрина , изучили  явления диализа и определения  вязкости нативного и денатурированного  белка.

В Таблице 2.1 представлены результаты на качественные реакции на аминокислоты.

В Таблицы 2.2 представлены результаты по изучению реакций диализа. В первый 3-х реакциях представлены реакции  с дистиллированной водой в которую  помещали пробирку с белково-солевой  смесью. В других 3-х реакциях представлено взаимодействие с белково-солевой  смесью, т.е. с раствором приготовленным нами альбумином. Проводимые параллельно  реакции различаются окончательному изменению цвета, что мы можем наблюдать в третьей колонке Таблицы 2.2.

Можно наблюдать разницу  в изменении цвета в третьей  колонке, это свидетельствует о  том ,что в реакции с раствором  яичного альбумина в растворе (NH₂)₂SO₄ через целлофановую плёнку проникли мелкие молекулы (NH₂)₂SO₄ .