Агароза

Обогащение фермента тиольньши группами. 30 мг фермента растворяют в 5 мл 0,1 М бикарбоната натрия (рН 8,2). Раствор деаэрируют в атмосфере азота в течение 15 мин; добавляют 0,1—2 мг метил-3-меркаптопропиоимидата. Тиолирование проводят при комнатной температуре в токе азота в течение 60 мин. Избыток имидата удаляют гель-фильтрацией через сефадекс G-25, в Качестве элюента используют 0,1 М бикарбонат иатрия. Для предотвращения окисления тиолированных ферментов в раствор сразу же после гель-фильтрации вводят дитиотреитол (до концентрации 1 ммоль/л).

Активирование тиол-сефарозы по Броклехурсту и др. [6]. Эпоксиактивированную агарозу (50 г) промывают на стеклянном фильтре 0,5 М фосфатным бу-

 

Присоединение аффинных лигандов с помощью N-оксисукцнннмидных эфиров агарозы

Куатреказас и Парих описали приготовление N-оксисук- цинимидных эфиров сукцинилированных аминоалкильных производных агарозы. Эти активные эфирные производные агарозы при хранении в диоксане устойчивы в течение нескольких месяцев. Они очень быстро образуют стабильные амидные связи (при 4°С) с непротонированными формами первичных алифатических или ароматических аминогрупп при рН 6—9. Из функциональных групп исследованных аминокислот только сульфгидрильные эф

фективно конкурируют с аминогруппами в реакции связывания. Реакция протекает по следующей схеме:

 

 

 

 

 

 

 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Установлена взаимосвязь между структурированием  системы в целом и поведением воды в процессе перехода раствор-студень. Переход раствор-студень изменяет структуру воды: образуется "связанная" и "свободная" вода.

Установлены конкурирующие взаимодействия: HgO - низкомолекулярная добавка /сож, глицерин, этиленгликоль и др./, полимер - низкомолекулярная добаика, полимер - Н^О и их роль в процессе структурирования системы агароза-вода-низкомолекулярная добавка.

Выяснено, что  в образовании студней участвуют  различные типы связей /водородные,гидрофобные и др./. Установлено, что с повышением концентрации все большую роль играют гидрофобные связи.

Определена  количественно относительная гидрофобность  агарозы /в условных единицах/ и ее водно-солевых растворов. Установлено, что внесение агарозы в водно-солевой раствор приводит к изменению относительной гидрофобности самого раствора, а, следовательно, и к изменению термодинамического состояния воды, тем большему, чем выше концентрация агарозы.

Найдено, что  с повышением температуры прочность, жесткость, твердость и вязкость водных студней агарозы уменьшаются, а с увеличением концентрации - возрастают. Релаксационные процессы развиваются тем быстрее, чем выше температура и ниже концентрация.

Процесс студнеобразования  в растворах агарозы сходен с процессом кристаллизации. В студнях, вероятно, существует определенное сочетание аморфных и кристаллических частей. Кристаллическая часть сообщает студню прочность, сочетающуюся с твердостью и жесткостью, а аморфная придает ему упругие и высокоэластические свойства.

 
1. Способ переработки красной водоросли анфельции тобучинской, включающий предобработку водоросли в гидроокиси кальция с концентрацией 1-2% в пересчете на окись кальция при нагревании и гидромодуле 1: 12-15, ее промывку водой, экстрагирование полисахарида, отделение экстракта и его очистку, охлаждение и желирование, промывание геля водой, очистку и сушку с получением конечного продукта, отличающийся тем, что водоросль перерабатывают одновременно с получением высокоочищенного агара и агарозы, за счет проведения предобработки водоросли в растворе окиси кальция при 100-105^oС в течение 60-90 мин с последующим повышением температуры реакционной смеси не выше 110^oС и выдерживанием при этой температуре в течение 60-90 мин, после чего экстракцию проводят 3-х кратно, причем после первой экстракции получают агар высокоочищенный, при этом экстракцию проводят при температуре 115-120^oС в течение 6-6,5 ч при гидромодуле 1: 10-12 без добавления окиси кальция, вторую экстракцию проводят при температуре 115-120^oС в течение 4-4,5 ч и гидромодуле 1: 6-6,5 с внесением окиси кальция в количестве 4,0-4,5% к воздушно-сухой водоросли, третью экстракцию проводят при температуре 115-120^oС в течение 2,0-2,5 ч с гидромодулем 1: 3-3,5 с добавлением окиси кальция в количестве 2,0-2,5% к массе воздушно-сухой водоросли, экстракты второй и третьей экстракции смешивают и фильтруют, желируют, полученный гель нарезают, промывают настаиванием в пресной воде, затем настаиванием в дистиллированной воде в течение 10-12 ч при гидромодуле 1: 2-3. 
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что очистку экстрактов агара и агарозы осуществляют на нутч-фильтре на фильтровальной перегородке, сформированной из слоя фильтровального порошка диатомита, слоем толщиной 0,5-1,0 см и фильтровального картона при температуре 80-85^oС.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Список  литературы

1. Струсовская Н.Л., Фигуровский Н.А., Комарова Т.А. Студни высокомолекулярных соединений с древнейших времен до середины XIX в. Москва, 1978. - 10 с, - Рукопись представлена редколлегией ж. "Вестн. МГУ, Химия". Деп. в ВИНИТИ 20 июля 1978, №2497-78.

2. Измайлова В.Н., Ребиндер П.А. Структурообразование в белковых системах. М.: Наука, 1976. - 268 с.

3. Меерсон С.И. Классификация студней на основании диаграмм состояния систем полимер-растворитель. - Труды по химии и хим. технологии, 1972, вып. 2(3l) , с. 125-133.

4. Липатов Ю.С., Прошлякова Н.Ф. Современные представления о гелеобразовании в растворах полимеров и о строении гелей. -Успехи химии, 1961, т. XXX, вып. 4, с. 517-531.

5. Цветков В.Н., Эскин В.Е., Френкель С.Я. Структура макромолекул в растворах. М.: Наука, 1964. - 720 с.

6. Фриш Т.Л., Симха Р.В. Реология. Теория и приложение. -М.: ИЛ, 1962. 824 с.

7. Тагер А.А., Древаль В.Е. Ньютоновская вязкость концентрированных растворов полимеров. Успехи химии, 1967, т. ХХХУ1, вып. 5, с. 888-910.

8. Древаль В.Е. Реология концентрированных растворов полимеров. В сб.: Реология. Полимеры и нефть. Новосибирск, 1977, с. 22-52.

9. Роговина Л.З., Слонимский Г.Л. Природа студнеобразова-ния, структура и свойства студней полимеров. Успехи химии, 1974, т. ХШ, вып. 6, с. II02-II35.