Состав крови: плазма и форменные элементы

Определение содержания гемоглобина  в крови

Пипеткой набирают 20 мм3 крови  и смешивают с 0,1 нормальным раствором  соляной кислоты, налитым в среднюю  пробирку гемометра Сали. После образования солянокислого гематина - соединения, имеющего интенсивный коричневый цвет, в пробирку по каплям прибавляют дистиллированную воду до уравновешивания цвета раствора в средней пробирке с цветом эталонных растворов. По нанесенной на пробирку шкале по уровню полученного раствора определяют концентрацию гемоглобина.

Гемолиз эритроцитов, виды гемолиза.

Гемолиз - это массивное  внутрисосудистое разрушение эритроцитов  с выходом свободного гемоглобина  в плазму. Гемоглобин начинает выделяться почками, что повреждает нефрон. Виды гемолиза:

1. Осмотический.

2. Химический.

3. Механический.

4. Термический.

5. Биологический.

Причины гемолиза в организме:

1. Переливание несовместимой  крови.

2. Сепсис, влияние гемолитических  микроорганизмов.

3. Попадание в организм  гемолитических ядов.

4. Отравление различными  органическими и минеральными  веществами.

Опасность гемолиза заключается  в развитии комбинированного шока, а в последующем - острой и хронической  почечной недостаточности.

Скорость оседания эритроцитов.

При стоянии крови, не свёртывающейся вследствие добавления антикоагулянтов, наблюдается оседание эритроцитов. СОЭ в норме равна у мужчин 1-10 мм/ч, у женщин - 2-15 мм/ч. На СОЭ  влияют главным образом свойства плазмы (содержание крупномолекулярных белков - фибриногена и глобулинов), а также размеры и форма  эритроцитов. При воспалительных и  онкологических заболеваниях скорость оседания эритроцитов возрастает в  связи с повышенной способностью эритроцитов образовывать агрегаты. На скорость оседания эритроцитов влияет белковый состав плазмы. СОЭ уменьшается  при увеличении содержания альбуминов и возрастает при увеличении концентрации фибриногена, гаптоглобина, липопротеидов, иммуноглобулинов.

 

Рис. Клетки периферической крови человека.

1 – эритроциты, 2- лимфоциты, 3- моноциты, 4 – нейтрофильные гранулоциты, 5 – эозинофильные гранулоциты, 6 – базофильные гранулоциты, 7 – тромбоциты.

 

1.6 Лейкоциты, их  виды и физиологическое значение

 

Лейкоциты содержатся в периферической крови в концентрации 4-9 ´ 109 /л. Увеличение количества лейкоцитов называется лейкоцитозом, снижение - лейкопенией. Причиной лейкопении являются токсические и радиационные воздействия на организм. Лейкоцитоз может развиваться у здорового  человека при мышечной работе, во время  сильных эмоций, после приёма пищи, у женщин при беременности. Патологический лейкоцитоз характерен для инфекционных и воспалительных заболеваний и  обеспечивает повышение реактивности организма. Определение числа лейкоцитов имеет большое диагностическое  заболевание.

Группы лейкоцитов:

1. Зернистые (гранулоциты). Содержат специфическую зернистость  в цитоплазме.

2. Незернистые (агранулоциты). Не содержат зернистости в  цитоплазме.

Гранулоциты - клетки диаметром 7-10 мкм подразделяются на:

а) Эозинофилы. Зернистость  окрашивается кислыми красителями. Обезвреживают и разрушают токсины  белкового происхождения, комплексы  антиген-антитело, фагоцитируют гранулы базофилов и тучных клеток, продуцируют гистаминазу, разрушающую гистамин. Количество увеличивается при аллергических реакциях, глистных инвазиях, интоксикациях;

б) Базофилы. Зернистость  окрашивается основными красителями, крупная, в цитоплазме - гранулы, содержащие гистамин и гепарин. Благодаря секреции гистамина и гепарина базофилы способствуют миграции нейтрофилов. Базофилы способствуют так же рассасыванию погибших тканей и заживлению. Мембрана базофилов  имеет рецепторы к иммуноглобулину Е, который комплементарен к иммунному комплексу, в составе которого есть этот глобулин. После гидролиза лизосомальными ферментами в цитоплазме базофила иммунного комплекса, рецептор вновь синтезируется и через 12 - 24 часа транслоцируется на поверхность мембраны. Благодаря таким циклам, базофил способен элиминировать из плазмы большое количество антигенов, блокированных иммуноглобулином Е.

в) Нейтрофилы имеют мелкую зернистость, которая окрашивается нейтральными красителями. По форме  ядра и зрелости делятся на:

- юные (метамиелоциты) - ядро рыхлое, бобовидное,

- палочкоядерные - ядро в виде изогнутой палочки, подковки или буквы S,

- сегментоядерные - ядро состоит из 2-3 долек, связанных между собой тонкими перемычками. Это зрелые нейтрофилы.

Нейтрофилы - микрофаги - фагоцитируют, переваривают и уничтожают микробов, обладают противовирусным действием (продуцируют интерферон). Метаболической особенностью нейтрофилов является анаэробный гликолиз, поэтому нейтрофилы способны осуществлять фагоцитоз в разрушенных и размозженных тканях с ограниченной оксигенацией.

Агранулоциты не содержат зернистости.

а) Лимфоциты - клетки размером 4,5 - 10 мкм ( подразделяются на малые, средние, большие). Содержат очень плотное, темное ядро, цитоплазма окружает ядро в виде узкой каймы, окрашивается в голубой или синий цвет основными красителями.

По функции и месту  созревания лимфоцитов различают:

- Т-лимфоциты - дифференцируются  в тимусе. Участвуют в клеточном  иммунитете.

- В-лимфоциты - дифференцируются  в костном мозге. Синтезируют  антитела и участвуют в гуморальном  иммунитете.

б) Моноциты имеют размеры 10-12 мкм, ядро - бобовидное, подковообразное, дольчатое, цитоплазма окружает ядро более  широкой полосой, светло-голубая. Являются тканевыми макрофагами. Завершают  процесс фагоцитоза в очагах воспаления, фагоцитируют и собственные поврежденные ткани. Способствуют восстановлению, регенерации.

Лейкоцитарная формула - это  процентное соотношение всех видов  лейкоцитов. Лейкоцитарная формула, наряду с изучением изменений  числа лейкоцитов имеет диагностическое  значение.

 

Гранулоциты						Агранулоциты
Базофилы	Эозинофилы	Нейтрофилы				Лимфоциты	Моноциты
		миелоциты	юные	палочкоядерные	сегментоядерные
0-1%	1-5%	0%	0-1%	1-5%	45-70%	20-40%	2-10%

 

Ядерный сдвиг лейкоцитарной  формулы влево - увеличение молодых  форм и появление в периферической крови незрелых клеток (миелоциты, промиелоциты). Увеличение сегментоядерных форм при снижении более молодых называется ядерный сдвиг вправо. Сдвиг влево отражает высокие потенциальные возможности костного мозга в отношении продукции лейкоцитов и является хорошим прогностическим признаком при заболеваниях.

Подсчет числа лейкоцитов.

Кровь разводится в 20 раз 5% раствором  уксусной кислоты, подкрашенной метиленовой  синью. Заполняют камеру Горяева  и под микроскопом подсчитывают число лейкоцитов в 25 больших (400 маленьких) квадратах. Расчет числа лейкоцитов в 1 мкл производится по формуле:

 

 

 

 

где Х - число лейкоцитов искомое,

В - число лейкоцитов в 25 больших  квадратах.

 

Тромбоциты и их роль в  организме.

Тромбоциты имеют дисковидную  форму диаметром от 2 до 5 мкм, толщиной около 0,5 мкм. В крови содержится 180-320 х 109 /л. Образуются в костном  мозге.

Значение тромбоцитов  в организме:

1) Участвуют в гемостазе  (содержат тромбоцитарные факторы свёртывания).

2) Участвуют в транспорте  креаторных веществ, важных для сохранения сосудистой стенки, стимулируют восстановление эндотелия.

3) Возможно, фагоцитируют низкомолекулярные соединения.

Мембрана тромбоцитов  содержит рецепторы, необходимые для  активации тромбоцитов, их адгезии (приклеиванию к субэндотелию) и агрегации. Мембрана содержит фосфолипидный фактор 3, формирующий активные коагуляционные комплексы с плазменными факторами свертывания крови. В мембрану встроены гликопротеины, ответственные за адгезию тромбоцитов к коллагену, имеются рецепторы к фактору Виллебранда. Гранулы цитоплазмы содержат АТФ, кальций, серотонин, катехоламины. Кальций регулирует адгезию, образование тромбоксана А2, АДФ, способствует агрегации. Серотонин и катехоламины обеспечивают сокращение сосудов в местах их повреждений.

 

1.7 Группы крови,  резус-фактор

 

Проблема групповой принадлежности крови была решена исследованиями К. Ландштейнера и Я. Янского, что позволило широко применить в практической медицине переливание крови. Было установлено, что мембрана эритроцитов человека является носителем более 300 антигенов, обладающих способностью вызывать против себя образование иммунных антител. Система антигенов эритроцитов АВО отличается от других групп крови тем, что содержит в сыворотке крови естественные анти-А (альфа) и анти-В (бета) антитела-агглютинины. Антитела не вырабатываются против "своего", т.е. присутствующего в эритроците данного человека антигена - А, В, и Н. Однако антигены А и В широко распространены в животном мире, поэтому после рождения человека в его организме начинается формирование антител против антигенов А и В, поступающих с пищей, бактериями. В результате в плазме появляются анти-А и анти-В антитела, максимум активности их продукции приходится на 8 - 10 летний возраст. Эти антитела называются изоантителами, или агглютининами, поскольку они вызывают склеивание (агглютинацию) эритроцитов, содержащих на мембране соответствующие антигены (агглютиногены).

Группы крови определяют путем постановки реакции агглютинации крови реципиента (человека, которому переливают кровь) со стандартными сыворотками I-IV групп крови, полученных от доноров. Варианты возможных результатов  реакций представлены в таблице:

- отсутвие реакции несовместимости при переливании крови донора

 

Группа сыворотки (реципиента)	Группа эритроцитов (донора)
	I (0)	II (А)	III (В)	IV(АВ)
I (a и b)	-	+	+	+
II (b)	-	-	+	+
III (a)	-	+	-	+
IV (0)	-	-	-	-

 

В дальнейшем с расширением  использования переливаний крови  в практической медицине начали фиксировать  случаи несовместимости крови при  правильном установлении групповой  принадлежности в системе АВО. Врачи  сразу же обратили внимание на тот  факт, что во всех этих случаях кровь  переливалась повторно. Проблема была решена К.Ландштейнером и И.Винером. Оказалось, что эритроциты человека, помимо агглютиногенов А и В, могут содержать антиген, обозначенный как резус-фактор. Синтез резус-антигенов эритроцитов контролируется хромосомой. Rh-антигены представлены на мембране эритроцитов тремя связанными участками: антигенами С, E и D. Из этих антигенов лишь "Д" является сильным антигеном, т.е. способным иммунизировать не имеющего его человека. Все люди, имеющие Д-антиген, называются "резус-положитльными" (Rh+), а не имеющие его - "резус-отрицательными" (Rh-). При первом переливании резус-отрицательному реципиенту резус-положительной крови происходит иммунизация с выработкой антител против резус-фактора, которые в дальнейшем сохраняются в течение всей жизни. Повторное переливание этому человеку резус-положительной крови приводит к агглютинации эритроцитов перелитой крови и тяжелой реакции несовместимости.

 

1.8 Переливание  крови. Кровезаменители

 

Переливание цельной крови  в настоящее время проводится с целью восполнения объема крови  после острой массивной кровопотери, которая может привести к быстрой  гибели организма. При переливании  крови учитывается ее групповая  и резус совместимость, а также  индивидуальная совместимость. Несмотря на то, что лицам со второй группой  крови можно перелить кровь второй и первой групп; лицам с третьей  группой - третьей и первой; а лицам  с четвертой группой (универсальные  реципиенты - им можно перелить кровь любой из четырех групп), в настоящее время переливают строго одногруппную кровь (!), совпадающую по резус-фактору. Однако в экстренных ситуациях по жизненным показаниям при отсутствии одногруппной крови допускается однократное переливание лицам с любой группой крови 200 мл крови универсальных доноров (лиц с первой резус-отрицательной группой крови).

Классификация препаратов крови и кровезамещающих растворов.

I. Препараты крови.

1. Цельная консервированная  кровь.

2. Препараты форменных  элементов крови: а) эритроцитарная масса; б) лейкоцитарная масса; в) тромбоцитарная масса.

3. Препараты плазмы: а)  препараты цельной плазмы (нативная плазма, свежезамороженная плазма, сухая плазма, гипериммунная плазма); б) препараты компонентов плазмы (10-20% растворы альбумина, растворы иммуноглобулинов, криопреципитат ).

II. Препараты кровезаменителей.

Кровезамещающие растворы предназначены  для экстренного восполнения  объема крови после массивных, опасных  для жизни кровопотерь. В этих ситуациях наиболее эффективным  препаратом явилась бы собственная  кровь пострадавшего или одногруппная резус совместимая. Однако ряд причин приводит к разработке новых составов и увеличению производства кровезамещающих растворов:

1. Невозможность обеспечить  донорской кровью пострадавших  при массовых авариях и катастрофах.

2. Высокая коммерческая  стоимость донорской крови.

3. Ограниченные сроки  ее хранения, которое к тому  же требует соблюдения специальных  условий.

4. Необходимость выполнения  перед трансфузией проб на  биологическую совместимость.

5. Опасности для реципиентов,  связанные с многократными переливаниями  донорской крови, возможностью  попадания в организм возбудителей  инфекционных заболеваний - микроорганизмов,  вирусов.

По своим эффектам кровезамещающие  растворы способны имитировать отдельные  функции цельной крови. Кровезамещающие  растворы должны отвечать ряду условий: иметь равное осмотическое давление с клетками организма, приближаться к крови по концентрациям катионов, анионов, питательных и буферных веществ. Показатель рН должен быть равен 7,3 - 7,4.

1. Растворы коллоидов

а) растворы гемодинамического  ряда (способны длительно циркулировать  в сосудистом русле, поддерживая  системное артериальное давление; при  введении вызывают дополнительное привлечение жидкости из интерстиция в сосудистое русло). Это препараты крупномолекулярной фракции гидролизированного декстрана - полиглюкин, макродекс, желатиноль;

б) растворы реологического ряда (способны улучшать функционирование микроциркуляторного русла органов  и тканей) - это препараты среднемолекулярной фракции декстрана - реополиглюкин, реомакродекс, реоглюман;

в) растворы дезинтоксикационного ряда (способны связывать циркулирующие в крови токсические продукты и выводить их из организма через почечный фильтр) - это производные низкомолекулярного поливинилпирролидона - гемодез, полидез, энтеродез;