Микробиология

    С О Д Е Р Ж  А Н И Е 

1. Анаэробы-возбудители анаэробной инфекции. Клостридии газовой гангрены, столбняка, ботулизма. Общие свойства. Механизм заражения. Особенности заболеваний. Принципы лабораторной диагностики. Иммунобиологические препараты для профилактики и лечения. Получение. Использование.

2. Энтеровирусы. Общая характеристика. Вирусы полиомиелита. Механизм заражения. Строение, антигенные  свойства, методы культивирования.  Лабораторная диагностика: вирусологический  метод (культивирование и идентификация  вируса), серологический метод. Иммунобиологические  препараты для диагностики, профилактики  и лечения. Полиомиелитные вакцины.  Получение. Использование.

3. Препараты  бактериофагов. Примеры. Получение,  титрование, хранение бактериофагов.  Фаготерапия, фагопрофилактика, фагодиагностика.

Ситуационная  задача

Список  использованной литературы 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

    1. Анаэробы-возбудители анаэробной инфекции. Клостридии газовой гангрены, столбняка, ботулизма. Общие свойства. Механизм заражения. Особенности заболеваний. Принципы лабораторной диагностики. Иммунобиологические препараты для профилактики и лечения. Получение. Использование.  

    Анаэробы  — организмы, получающие энергию  при отсутствии доступа кислорода  путем субстратного фосфорилирования, конечные продукты неполного окисления  субстрата при этом могут быть окислены с получением большего количества энергии в виде АТФ в присутствии  конечного акцептора протонов организмами, осуществляющими окислительное  фосфорилирование.

    Анаэробы  — обширная группа организмов, как  микро-, так и макроуровня:

    анаэробные  микроорганизмы — обширная группа прокариотов и некоторые простейших.

    макроорганизмы  — грибы, водоросли, растения и некоторые  животные (класс фораминиферы, большинство  гельминтов (класс сосальщики, ленточные  черви, круглые черви (например, аскарида)).

    Помимо  этого анаэробное окисление глюкозы  играет важную роль в работе поперечно-полосатой  мускулатуры животных и человека (особенно в состоянии тканевой гипоксии).

    Термин  «анаэробы» ввел Луи Пастер, открывший  в 1861 году бактерии маслянокислого брожения. Анаэробное дыхание — совокупность биохимических реакций, протекающих  в клетках живых организмов при  использовании в качестве конечного  акцептора протонов не кислорода, а  других веществ (например, нитратов) и  относится к процессам энергетического  обмена (катаболизм, диссимиляция), которые  характеризуются окислением углеводов, липидов и аминокислот до низкомолекулярных  соединений.

    Клостридии.

    Общая характеристика патогенных анаэробных бактерий.

    Облигатные  анаэробы - микроорганизмы, живущие  только в условиях крайне низкого  содержания кислорода - в почве, иле  водоемов, кишечниках позвоночных и  человека. У теплокровных анаэробы составляют основную массу нормальной кишечной микрофлоры и определяют ряд  важнейших функций организма.

    Разнородную группу анаэробных грамположительных  бактерий дифференцируют прежде всего  по способности к спорообразованию и морфологическим особенностям. В патологии человека наибольшее значение имеют анаэробные спорообразующие  бактерии рода Clostridium. Среди неспорообразующих  грамположительных анаэробов медицинское  значение имеют семейство лактобацилл (Lactobacillaceae) и род бифидобактерий (Bifidibacterium),  в патологии - неспорообразующие  грамотрицательные анаэробы родов Bacteroides (бактероиды) и Fusobacterium (фузобактерии).

    Род Clostridium.

    Это подвижные крупные палочки (большинство  видов), образуют овальные или круглые  эндоспоры, придающие клостридиям (греч. kloster - веретено) ветеренообразную форму. Спора в диаметре больше диаметра (поперечника) вегетативной клетки. Грамположительны, хемоорганотрофы. Строгие анаэробы.

    По  экологическим и патогенным свойствам  можно выделить три группы клостридий: - сапрофиты, вызывающие бродильные (сахаролитические) процессы;

    - сапрофиты, вызывающие процессы  гниения (протеолиза);

    - патогенные виды - по биохимическим  свойствам могут вызывать процессы  гниения и брожения. Патогенные  виды клостридий условно разделить  на три группы - возбудителей травматических (раневых) клостридиозов - газовой  гангрены, столбняка, возбудителей  энтеральных клостридиозов (токсикоинфекций) - ботулизма, псевдомембранозного  колита и виды, вызывающие патологические процессы только в ассоциациях между собой или с другими микроорганизмами.

    Современная систематика выделяет пять групп  клостридий по расположению спор, способности  гидролизовать желатин и наличию  особых условий для роста. Все  патогенные для человека виды ферментируют желатин, отличаясь расположением  спор - терминальное (в виде тенисных ракеток) у четвертой группы (C.tetani - возбудитель столбняка), субтерминальное (веретено) у второй группы (остальные  возбудители: C.botulinum- возбудитель ботулизма, C.perfringens и другие возбудители газовой  гангрены, C.difficile - возбудитель псевдомембранозного  колита).

    Микробиология газовой гангрены.

    Газовая гангрена - анаэробная поликлостридиальная (т.е. вызываемая различными видами клостридий) раневая (травматическая) инфекция. Основное значение имеет C.perfringens, реже - C.novyi, а  также другие виды клостридий в стойких  ассоциациях между собой, аэробными  гноеродными кокками и гнилостными  анаэробными бактериями.

    C.perfringens - нормальный обитатель кишечников  человека и животных, в почву  попадает с испражнениями. Является  возбудителем раневой инфекции - вызывает заболевание при попадании  возбудителя в анаэробных условиях  в раны. Обладает высокой инвазивностью  и токсигенностью. Инвазивность  связана с выработкой гиалуронидазы  и других ферментов, оказывающих  разрушающее действие на мышечную  и соединительную ткани. Главный  фактор патогенности - экзотоксин, оказывающий  гемо-, некро-, нейро-, лейкотоксическое  и летальное воздействие. В  соответствии с антигенной специфичностью  экзотоксинов выделяют серотипы  возбудителя. Наряду с газовой  гангреной C.perfringens вызывает пищевые  токсикоинфекции (в их основе - действие энтеротоксинов и некротоксинов).

    Особенности патогенеза. В отличии от гнойных  заболеваний, вызываемых аэробами, при  анаэробной инфекции преобладает не воспаление, а некроз, отек, газообразование  в тканях, отравление токсинами и продуктами распада тканей. Клостридии - некропаразиты, активно создающие анаэробные условия и вызывающие некроз тканей, т.е. условия для своего размножения. Некроз мышечной и соединительной тканей - следствие некротоксического действия токсинов и ферментов, газообразование в тканях - результат ферментативной активности клостридий. Общее действие токсинов (общая интоксикация) проявляется преимущественно в нейротоксическом воздействии.

    Иммунитет - преимущественно антитоксический.

    Лабораторная  диагностика включает бактериоскопию отделяемого ран, выделение и  идентификацию возбудителя, выявление  и идентификацию токсина в  биопробах с использованием реакции  нейтрализации специфическими антитоксическими антителами.

    Особенностью  всех спорообразующих бактерий является устойчивость к нагреванию, что учитывается  при лабораторной диагностике - исследуют  прогретую и непрогретую пробы. При исследовании на клостридии одну (непрогретую) пробу засевают на жидкие среды (казеиновые или мясные) и плотные  дифференциально - диагностические  среды (Вильсон - Блера, Виллиса - Хоббса). Другие части исходного материала  прогревают при +80 и +100о С в течение  до 20 минут и засевают в жидкие накопительные среды. Выросшие культуры грамположительных палочек пересевают на плотные дифференциально - диагностические  среды.

    Среда Виллиса - Хоббса содержит кроме питательного агара, лактозу, индикатор, яичный желток и обезжиренное молоко. Дифференциация видов клостридий осуществляется по изменению цвета индикатора в  красный (ферментация лактозы) и  наличию вокруг колоний зоны (ореола) опалесценции (лецитиназная активность). Колонии C.perfringens окрашены в цвет индикатора и имеют ореол опалесценции.

    Профилактика  и лечение. В основе предупреждения газовой гангрены - своевременная  и правильная хирургическая обработка  ран. При тяжелых ранениях вводят антитоксические сыворотки против основных видов клостридий по 10 тысяч МЕ, в лечебных целях - по 50 тысяч МЕ.

    Clostridium difficile.

    Это представитель нормальной микрофлоры кишечника, редко вызывает газовую  гангрену, является возбудителем псевдомембранозного  энтероколита - результата нерациональной антибиотикотерапии и развития дисбактериоза, обусловленного доминированием этого  возбудителя. При применении антибиотиков (особенно клиндомицина, ампициллина  и цефалоспоринов) и цитостатиков возникает глубокий дисбаланс микрофлоры кишечника и колонизация его C.difficile. Токсический компонент патогенности этого вида клостридий состоит из энтеротоксина и цитотоксина. Возбудитель  проявляет высокую резистентность к антибиотикам широкого спектра, что  способствует массированной колонизации  кишечника и секреции большого количества токсинов, вызывающих изменения кишечной стенки. Псевдомембранозный колит - госпитальная инфекция, доминирующая среди кишечных поражений, однако бактериологически  трудно выявляемая (сложности выделения  и изучения анаэробов).

    Микробиология столбняка.

    Столбняк - острая раневая инфекция, характеризующаяся  поражением нейротоксином двигательных клеток спинного и головного мозга, которое проявляется в виде судорог  поперечно - полосатой мускулатуры. Болеют люди и сельскохозяйственные животные. Почва, особенно загрязненная испражнениями человека и животных, является постоянным источником заражения  столбняком.

    Возбудитель - C.tetani - крупная спорообразующая  грамположительная палочка. Споры  располагаются терминально (вид  барабанной палочки), подвижна за счет жгутиков - перитрихов. Обязательный анаэроб. Споры обладают очень высокой  устойчивостью.

    Антигенные  свойства. Возбудитель имеет О- и  Н- антигены.

    Факторы патогенности. Главный фактор - сильнейший экзотоксин. Выделяют две его основные фракции - тетаноспазмин (нейротоксин) и тетанолизин (гемолизин). Нейротоксин  в центральную нервную систему  проникает в области мионевральных  синапсов, передается от нейрона к  нейрону в области синапсов, накапливается  в двигательных зонах спинного и  головного могза, блокирует синаптическую  передачу. Смерть наступает от паралича дыхательного центра, асфиксии (поражение  мышц гортани, диафрагмы, межреберных  мышц) или паралича сердца.

    Лабораторная  диагностика. Микробиологическая диагностика  включает бактериоскопию исходных материалов, посев для выделения возбудителя  и его идентификацию, обнаружение  столбнячного токсина.

    Исследованию  подлежит материал от больного (особенно в местах проникновения возбудителя  в организм - из ран), трупа (кровь, кусочки  печени и селезенки), перевязочный и  шовный хирургический материал, пробы  почвы, пыли и воздуха.

    Выделение возбудителя проводят по стандартной  для анаэробов схеме, используя  различные плотные и жидкие (среда  Китта - Тароцци) среды, идентификацию - на основе морфологических, культуральных, биохимических и токсигенных  свойств.

    Наиболее  простой и эффективный метод  микробиологической диагностики - биопроба на белых мышах. Одну группу заражают исследуемым материалом, вторую (контрольную) - после смешивания проб с антитоксической  столбнячной сывороткой. При наличии  столбнячного токсина опытная группа мышей погибает, контрольная - остается живой.

    Лечение и экстренная профилактика. Используют донорский противостолбнячный иммуноглобулин (антитоксин), антитоксическую сыворотку (350МЕ/кг), антибиотики (пенициллины, цефалоспорины). Для создания вакцинального иммунитета используют столбнячный анатоксин, чаще в составе АКДС вакцины (анатоксины столбняка, дифтерии и убитые коклюшные  палочки).