Проблемно-ситуационная задача

Случай аварии и проведённые мероприятия по её устранению сообщить руководству, зарегистрировать во внутрилабораторный журнал по технике безопасности.

Пробы взять на повторное исследование.

 

Проблемно-ситуационная задача

В лабораторию на исследование общего белка принесли гемолизированную сыворотку. Лаборант провёл исследование.

Задания

1.  Как  будет отражаться на полученных результатах исследование гемолизированной сыворотки? Какой метод можно применить для разделения белка на фракции для клинической диагностики?

2.  Определите  концентрацию общего белка в сыворотке крови биуретовым методом.

Эталон ответа

1.  Гемолизированную сыворотку использовать нельзя. Это приведет к ложно- положительным результатам.

Наиболее информативным методом фракционирования белков является электрофорез, который позволяет определить как качественный, так и количественный состав белков. При использовании ЭФ (электрофореза) на пленках из ацетата целлюлозы или агаровом геле получают 5 фракций белков: альбумины, 1 ,  2 , и - глобулины. Определение белковых фракций с диагностической точки зрения более значимо, т.к. общий белок может быть в норме, а соотношение белковых фракций будет указывать на ту или иную патологию (диспротеинемия).

 

 

Проблемно-ситуационная задача

Больному А. назначено определение мочевины и общего белка. Сыворотка оказалась гемолизированной, лаборант провёл исследование.

Задания

1.  Объясните сложившуюся ситуацию, при исследовании каких аналитов гемолиз не повлияет на результаты? Какое основное азотосодержащее вещество является конечным продуктом катаболизма белков, от чего зависит увеличение или снижение мочевины в крови?

2.  Определите концентрацию мочевины в сыворотке крови уреазным методом.

Эталон ответа

1.  Следы гемолиза мешают определению  общего белка. Деструкция клеток приводит к выходу белка из внутриклеточных компонентов и сопровождается увеличением этого компонента в крови. В данном случае может быть исследована только мочевина, гемолиз не повлияет на результаты.

Мочевина является основным азотосодержащим конечным продуктом катаболизма белков.

Мочевина синтезируется в печени. Концентрация мочевины в крови зависит от скорости синтеза в печени и удаления ее почками. Уровень мочевины в сыворотке зависит от функции почек, т.к. в почках мочевина полностью фильтруется, ~50% ее реабсорбируется в почечных

канальцах. На почечную недостаточность указывает накопление в сыворотке мочевины. При тяжелых заболеваниях печени способность гепатоцитов синтезировать мочевину нарушается, и уровень ее снижается.

Проблемно-ситуационная задача

Контрольный материал используется в целях внутрилабораторного контроля качества. Лабораторному технику необходимо приготовить жидкий материал из лиофилизированной сыворотки путем добавления 1мл дистиллированной H 2 O для длительного хранения.

Задания

1.  Объясните, каковы условия хранения  контрольной сыворотки, которая уже разведена, но еще не используется для работы. Укажите ошибки, возникающие при манипуляциях с лиофилизированными контрольными образцами.

2.  Разведите лиофилизированный материал (сыворотку/плазму) для работы.

Эталон ответа

1.  Условия хранения: разделить контролирующий  материал в эппендорфы и заморозить, исключая повторное оттаивание и размораживание. При размораживании сыворотки, необходимо дать ей оттаять при комнатной температуре перед использованием для анализа. Повторное замораживание и оттаивание недопустимо.

Источники ошибок при манипуляциях с лиофилизированными контрольными образцами:

• потери вещества при открывании ампулы
• несоблюдение времени растворения пробы
• хранение при комнатной температуре
• многократное замораживание и оттаивание.

 

Проблемно-ситуационная задача

Для определения клубочковой фильтрации в лабораторию доставлена сыворотка, и моча пациента Р. Время сбора мочи в направлении не было указано.

Задания

1.  Оцените данную ситуацию. Что  такое клиренс креатинина, почему клиренс креатинина является хорошим индикатором скорости гломерулярной фильтрации?

2.  Определите концентрацию креатинина в сыворотке крови по реакции Яффе.

Эталон ответа

1.  Для расчета клубочковой фильтрации  необходимо определить креатинин в сыворотке и моче и знать минутный диурез.

Если время сбора мочи не указано, минутный диурез рассчитать невозможно и соответственно невозможно определить клубочковую фильтрацию. В этом случае следует сообщить клиницистам концентрацию креатинина сыворотки и мочи, потребовать указания времени сбора мочи и после получения необходимых данных выполнить расчеты клиренса.

Клиренс креатинина – индикатор клубочковой фильтрации. Креатинин не реабсорбируется и не секретируется почечными канальцами. Клиренс рассчитывают по способности почек фильтровать креатинин из крови.

 

Проблемно-ситуационная задача

Вам предстоит провести электрофорез белков. Вы должны определить рабочую сторону ацетат-целлюлозной (АЦ) пластики.

Задания

1.  Дайте определение ЭФ метода. Какие могут лабораторные ошибки при проведении электрофореза?

2.  Разведите лиофилизированный материал (сыворотку/плазму) для работы.

Эталон ответа

1.  Рабочая сторона на ацетат-целлюлозной пластинке является глянцевая поверхность пластинки.

Электрофорез – это движение заряженных частиц под влиянием внешнего электрического поля.

Лабораторные ошибки при проведении электрофореза:

• изменение рН буферного раствора
• неправильное нанесение образца на электрофореграмму
• несоблюдение режима проведения электрофореза.

Изменение рН буфера повлечет за собой изменение картины разделения.

 

Проблемно-ситуационная задача

При одновременном исследовании гликозилированного гемоглобина и глюкозы у 4х пациентов получены следующие параметры:

Задания

1.  Объясните, в каком из вариантов  явно присутствует лабораторная  ошибка.

Расскажите преимущества определения гликозилированного гемоглобина и диагностическое значение (Hb).

2.  Определите концентрацию глюкозы  в сыворотке крови глюкозооксидазным методом.

Эталон ответа

1.  Лабораторная ошибка присутствует  в варианте № 3, т.к. повышение  глюкозы должно сопровождаться  повышением гликозилированного гемоглобина. Необходимо найти ошибку в результатах определения глюкозы, повторить исследование, обратить внимание на пробоподготовку. Гликозилированный гемоглобин используется для диагностики сахарного диабета, преддиабета, вялотекущего диабета, а также для контроля за состоянием и лечением больных диабетом, дополнения к ГТТ.

Преимущества: уровень гликозилированного гемоглобина не зависит от времени суток, физических нагрузок, приема пищи, назначенных лекарств, эмоционального состояния.

Концентрация гликозилированного гемоглобина является показателем углеводного обмена за период, предшествующий определению за 3 месяца, а ГТТ свидетельствует о нарушении обменных процессов в настоящее время.

 

Проблемно-ситуационная задача

Альбумин взаимодействует в слабокислой среде с бромкрезоловым зелёным с образованием соединения сине-зелёного цвета. В качестве раствора сравнения лаборант использовал дистиллированную воду.

Задания

1.  Какие дополнительные измерения  необходимо проводить, если в  качестве контрольной пробы берется  вода, а не контроль на реактивы? Какие понятия используют для  оценки содержания альбумина  в сыворотке крови?

2.  Определите концентрацию альбумина  в сыворотке крови бромкрезоловым зелёным (БКЗ) методом.

Эталон ответа

1.  Если в качестве раствора сравнения  используется дистиллированная  вода, необходимо ещё провести  измерение пробы с бромкрезоловым зелёным (контроль на реактив), а затем показатель экстинкции контрольной пробы вычесть из показателей опытной и стандартной проб, и только потом рассчитать по формуле концентрацию альбумина.

Понятия для оценки содержания альбумина: «нормоальбуминемия, гипоальбуминемия и гиперальбуминемия» при нормальном, пониженном и повышенном содержании альбумина соответственно.

Основное место синтеза альбумина – печень.

Проблемно-ситуационная задача

При проведении глюкозотолерантного теста (ГТТ) у 2-х пациентов (обозначены «А» и «Б») получены следующие результаты содержания глюкозы:

«А» натощак 6,7 ммоль/л; через 1 час – 12,6 ммоль/л; через 2 часа – 8,3 ммоль/л;

«Б» натощак 5,5 ммоль/л; через 1 час – 9,2 ммоль/л; через 2 часа – 4,2 ммоль/л

Задания

1.  Дайте оценку полученным результатам. Можно ли проводить ГТТ пациентам, у которых натощак уровень  глюкозы 8,5 ммоль/л? Расскажите механизм действия инсулина и назовите контринсулярные гормоны.

2.  Определите концентрацию глюкозы  в сыворотке крови глюкозооксидазным методом.

Эталон ответа

1.  У пациента «А» нарушена толерантность  к глюкозе. У пациента «В» –  норма. Пациенту с уровнем глюкозы  натощак – 8,5 ммоль/л и выше проводить ГТТ нельзя, т.к. при таком высоком уровне глюкозы добавочно введенная глюкоза может привести к диабетической коме. Таким пациентам необходимо провести определение гликемического профиля на пищевую нагрузку до еды, после завтрака, до обеда, после обеда, перед ужином.

Инсулин оказывает многостороннее действие на обмен веществ: увеличивает проницаемость клеточных мембран, усиливает синтез гликогена из глюкозы, тормозит глюконеогенез, что сопровождается снижением уровня глюкозы в крови. Контринсулярные гормоны: кортизол, адреналин, глюкагон, гормон роста.

 

Проблемно-ситуационная задача

В инструкции для определения мочевой кислоты не были указаны длина волны и номер светофильтра.

Задания

1.  Объясните, как можно подобрать  длину волны, необходимой для  количественного определения мочевой  кислоты? Объясните причины повышенного  содержания мочевой кислоты.

2.  Определите концентрацию мочевой  кислоты в сыворотке крови  уриказным методом.

Эталон ответа

1.  Необходимо провести измерения  исследуемой пробы при разных  длинах волн. Та длина волны, при  которой оптическая плотность  наибольшая и будет соответствовать  необходимой для измерения.

Повышение содержания мочевой кислоты в крови наблюдается при нарушении ее выделения из организма (заболевания почек, ацидоз и др.); повышенном образовании пуринов при некоторых гематологических заболеваниях; приеме пищи, богатой пуринами.

Гиперурикемия – повышенное содержание мочевой кислоты; подагра сопровождается отложениями уратов Na (соли мочевой кислоты) в суставах и почечных канальцах, увеличением содержания мочевой кислоты.

 

Проблемно-ситуационная задача

При проведении лабораторных исследований на С-реактивный белок, медицинский техник случайно пролил сыворотку на свою защитную одежду.

Задания

1.  Как обезвреживается защитная одежда персонала клинико-диагностической лаборатории при загрязнении ее биологическим материалом? Дайте характеристику СРБ и его диагностическое значение.

2.  Определите СРБ в сыворотке  крови экспресс-латекс методом.

Эталон ответа

1.  Защитную одежду автоклавируют в паровом стерилизаторе (автоклаве) при 1 атм. 120°С 30 минут или замачивают в дезинфектанте (из расчета 1 литр дезинфектанта на 1 кг белья) на 60 минут.

 

СРБ – белок острой фазы, самый чувствительный и самый быстрый индикатор повреждения тканей при воспалении, некрозе, травме (через 4-6 часов после повреждения). СРБ получил свое название из-за способности вступать в реакцию преципитации с С-полисахаридом пневмококков (один из механизмов ранней защиты организма от инфекции). В сыворотке здорового человека СРБ отсутствует. При любых заболеваниях, либо после операции присоединение бактериальной инфекции или сепсиса, сопровождается повышением уровней белков острой фазы, позволяет использовать этот тест для наблюдения за течением болезни и контроля эффективности лечения.

 

 

 

Проблемно-ситуационная задача

В лаборатории при исследовании общего белка биуретовым методом у группы больных получены следующие результаты:

а) 56 г/л   в) 152 г/л

б) 72 г/л   г) 84 г/л

Задания

1.  Оцените  результаты исследований, применяя терминологию. Назовите дополнительные исследования, которые нужно провести больному с концентрацией общего белка - 152 г/л, чтобы выявить характер протеинемии?

2.  Определите  концентрацию общего белка в сыворотке крови биуретовым методом.

Эталон ответа

1.  Норма общего белка в сыворотке  крови: 65-85 г/л.

Оценка полученных данных:

а) гипопротеинемия   в) гиперпротеинемия

б) норма                         г) норма

 

Больному с концентрацией общего белка - 152 г/л, необходимо дополнительно провести электрофорез белков сыворотки для выявления парапротеинов и исследовать мочу на наличие белка Бенс-Джонса, чтобы выяснить характер гиперпротеинемии. Гиперпротеинемия сопровождает миеломную болезнь и другие заболевания, связанные с синтезом патологических белков парапротеинов.