Проблемно-ситуационная задача

Проблемно-ситуационная задача

В лаборатории проводится внутрилабораторный контроль качества. Перед вами представлена контрольная карта Шухарта за март 2013 г. с результатами содержания концентрации глюкозы в контрольном материале.

Задания

1.  Сделайте  вывод по представленной контрольной  карте Шухарта, согласно контрольным правилам Вестгарда. Назовите действия, которые надо предпринять медицинскому персоналу лаборатории. Какие контрольные материалы применяют для оценки правильности?

2.  Определите  концентрацию глюкозы в сыворотке  крови глюкозооксидазным методом.

Эталон ответа к экзаменационному билету № 1

1.  11 февраля показатели контрольного  измерения концентрации глюкозы  в контрольном материале выходит  за пределы Х ср ±3S, результат  контрольного исследования попадает  под контрольные правила Вестгарда. Если присутствует хотя бы одна из ошибок контрольных правил, то аналитическая серия исследований бракуется. Результаты исследований пациентов выдавать нельзя.

  Действия, которые надо предпринять  медицинскому персоналу лаборатории:

• найти источники ошибок (случайная, систематическая и т.д.)
• устранить причины ошибок
• провести измерения контрольного материала
• провести повторное исследование глюкозы в пробах пациентов.

Для оценки правильности используют контрольные материалы (сыворотка или плазма) с аттестованными, известными концентрациями всех определяемых аналитов.

 

Проблемно-ситуационная задача

Для ведения внутрилабораторного контроля качества была проделана установочная серия с контрольной сывороткой «HUMATROL» для всех определяемых аналитов. По результатам установочной серии составили карту Шухарта для общего белка: Х средняя – 68 г/л, среднеквадратическое отклонение (S) – 2г/л. Результаты последующих исследований общего белка в контрольной сыворотке той же серии ежедневно наносились на карту Шухарта.

Задания

1.  Рассчитайте  и оцените воспроизводимость установочной серии, если в аналитической характеристике к набору реактивов указано, что коэффициент вариации не более 5%. Дайте определение воспроизводимости.

2.  Определите  концентрацию общего белка в  сыворотке крови биуретовым методом.

Эталон ответа

1.  Воспроизводимость – это качество, которое характеризует близость друг к другу результатов исследований, выполненных в различных условиях.

Расчётная формула коэффициента вариации:

СV = S  : X • 100%

Х средняя – 68 г/л

среднеквадратическое отклонение (S) – 2г/л

СV = 2  : 68 • 100% = 2,91%

Воспроизводимость хорошая, не более 5 %.

 

 

Проблемно-ситуационная задача

Источником лабораторных ошибок является неучтённое временя последнего приема пищи больного. Пациент В. принимал пищу перед взятием крови на исследование глюкозы.

Задания

1.  Поясните  воздействие этого фактора при  определении глюкозы? Назовите факторы внутрилабораторного характера, влияющие на результаты анализа.

2.  Определите  концентрацию глюкозы в сыворотке  крови глюкозооксидазным методом.

Эталон ответа

1.  Приём пищи приводит к различиям  в концентрации составных частей  крови, а в данном случае, к  увеличению глюкозы в крови.

Необходимо исследовать кровь, взятую натощак (выдержав 8-12 часов голодания).

На результаты анализа могут влиять следующие факторы внутрилабораторного характера:

• условия хранения пробы
• гемолиз
• липемия
• сроки хранения реактивов
• характер дозирования
• используемые методы
• человеческий фактор.

Проблемно-ситуационная задача

Стандартная калибровочная кривая для определения общего белка построена в интервале линейности от 40 г/л до 85 г/л, что соответствует оптической плотности 0,100 до 0,400. Оптическая плотность измеряемой пробы составила – 0,500.

Задания

1.  Дайте  оценку сложившейся ситуации  и пути решения проблемы. Расскажите  алгоритм построения калибровочного  графика.

2.  Определите  концентрацию общего белка в  сыворотке крови биуретовым методом.

Эталон ответа

1.  Оптическая  плотность выходит за пределы  линейности. В этом случае при  более высокой величине экстинкции  сыворотку следует развести 0,9% раствором  NaCl (физиологическим раствором) или дистиллированной водой. Повторить определение и при расчете учесть коэффициент разведения.

 

Для построения калибровочного графика готовят основной стандартный раствор белка, затем из него делают разведения и получают несколько стандартных растворов разной концентрации. С каждым стандартом проводят биуретовую реакцию, затем определяют оптическую плотность каждого раствора. По полученным данным строится калибровочный график на миллиметровой бумаге. Масштаб выбирается так, чтобы график проходил под углом в 45°.

Проводятся оси координат, на оси абсцисс откладываются известные концентрации стандартных растворов, а на оси ординат – соответствующие им значения оптической плотности. Через точки пересечения проводят прямую линию. Пользуясь калибровочным графиком, рассчитывают неизвестные концентрации исследуемого вещества в пробе.

Проблемно-ситуационная задача

Линейность метода определения мочевины в сыворотке крови уреазным методом, сохраняется до концентрации мочевины – 17 ммоль/л. У больного К. уровень мочевины в сыворотке крови составил – 24 ммоль/л

Задания

1.  Дайте  оценку результатам и объясните, как поступить в данной ситуации. Расскажите состояние, какого вида  обмена характеризует азотемия?

2.  Определите  концентрацию мочевины в сыворотке  крови уреазным методом.

Эталон ответа

1.  В этом случае результаты исследования выдавать нельзя, т.к. при содержании концентрации мочевины в сыворотке крови выше линейности (17 ммоль/л), исследуемую сыворотку следует развести физиологическим раствором или дистиллированной водой, а в расчётах учесть степень разведения. Измерение экстинкции проводить не позже чем через 15 минут, т.к. в более поздние сроки окраска проб изменится.

 

Азотемия характеризует состояние азотистого обмена.

Азотемия – это повышение уровня остаточного азота в крови. Азотемия бывает относительная (дегидратационная) и абсолютная, которая делится на ретенционную (почечная и внепочечная) и продукционную.

Проблемно-ситуационная задача

При фотоколориметрировании опытной пробы на альбумин, показатели экстинкции одной и той же пробы постоянно возрастали. Лабораторный техник обратил на это внимание и устранил причину.

Задания

1.  Каким  образом лабораторный техник  устранил причину. Дайте определение  экстинкции. Расскажите принцип  метода определения альбумина (БКЗ) методом.

2.  Определите  концентрацию альбумина в сыворотке  крови бромкрезоловым зелёным (БКЗ) методом.

Эталон ответа

1.  Экстинкция при измерении одной  и той же пробы возрастала  в связи с тем, что по передней  рабочей поверхности кюветы стекала  капля исследуемого раствора. Лабораторный  техник обратил внимание и  устранил ошибку, протерев кюветы.

Экстинкция – это оптическая плотность вещества, которая прямо пропорциональна концентрации вещества, толщине слоя и обратно пропорциональна пропусканию света.

Принцип метода: при взаимодействии альбумина с бромкрезоловым зелёным в слабокислой

среде, образуется окрашенный комплекс сине-зелёного цвета, имеющий максимум

поглощения при длине волны 628 нм.

 

Проблемно-ситуационная задача

При определении глюкозы ферментативным методом, после добавлениявсех реагентов и инкубации проб, растворы в пробирках окрасилисьнеоднородно: верхний слой был окрашен интенсивнее в сравнении с нижним слоем.

Задания

1.  Объясните  причину этого явления, и каковы  действия устранения ошибки.

Преимущества определения гликозилированного гемоглобина перед ГТТ (глюкозо-толерантный тест).

2.  Определите  концентрацию глюкозы в сыворотке  крови глюкозооксидазным методом.

Эталон ответа

1.  В данном случае произошло  наслоение добавляемых реагентов. После добавления всех реагентов  пробы должны быть тщательно  перемешаны для получения однородной  окраски и только в этом  случае можно перейти к измерению  оптической плотности с целью  получения адекватных результатов.

 

Для выявления скрытых и вялотекущих форм сахарного диабета проводят определения ГТТ (тест толерантности к глюкозе) и гликозилированного гемоглобина. Гликозилированный гемоглобин является показателем уровня гликемии за период, предшествующий определению за 3 месяца, а ГТТ свидетельствует о нарушении обменных процессов в момент взятия крови на анализ. Ценность определения гликозилированного Hb:

• уровень его не зависит от времени суток
• от физических нагрузок
• от приема пищи
• от назначенных лекарств
• от эмоционального состояния.

 

Проблемно-ситуационная задача

В лаборатории при исследовании общего белка в сыворотке крови биуретовым методом, получен следующий результат – 125 г/л

Задания

1. Оцените  полученный результат с позиции  «норма-патология». Какие дополнительные  исследования необходимо провести  в этом случае?

2. Определите  концентрацию общего белка в  сыворотке крови биуретовым методом.

 

Эталон ответа

1.  Полученный результат говорит  о гиперпротеинемии.

Норма общего белка в сыворотке крови: 65-85 г/л.

В данном случае необходимо дополнительно провести дифференциальную диагностику – электрофорез белков, для выявления изменений в различных белковых фракциях и парапротеинов, можно также провести определение на белок Бенс-Джонса в моче, так как при миеломной болезни наблюдается появление этого белка в моче.

 

Проблемно-ситуационная задача

Для определения мочевой кислоты к субстратно-буферной смеси необходимо добавить 0,05 мл сыворотки. Лаборант взял дозатор с переменным объемом от 5 до 40 мкл

Задания

1.  Дайте  оценку действиям лаборанта. Расскажите  основные режимы дозирования  и правила работы с дозаторами.

2.  Определите  концентрацию мочевой кислоты  в сыворотке крови уриказным методом.

Эталон ответа

1.  Лаборант взял дозатор с несоответствующим  объемом, т.к. 0,05 мл составляет 50 мкл;

необходимо для этой процедуры использовать либо дозатор на 50 мкл, либо дозатор с переменным объемом от 40 до 200 мкл. Основные режимы дозирования: прямое, обратное, многократное дозирование. Прямое дозирование – весь забранный объем жидкости сбрасывается за один полный ход поршня, подходит для дозирования водных растворов.

Обратное дозирование – в наконечник набирается больший по сравнению с дозируемым объемом жидкости. По окончании дозирования в наконечнике остается остаточный объем жидкости, который нивелирует погрешность, связанную с образованием пены. Этот способ дозирования используется для биологических, вязких и пенящихся жидкостей, а также дозирования очень малых объемов. Многократное дозирование – предполагает повторяющиеся операции дозирования идентичных объемов жидкости. В этом случае используют электронные дозаторы, что позволяет повторять дозирование после однократного заполнения наконечника. Правила работы с дозаторами: дозатор подбирается в соответствии с объемом, указанным в методике, в реактив опускается только наконечник на 2-3 мм, который используется только один раз, при заборе реагента кнопка дозатора (плунжер) нажимается до первого упора и реагент выпускается нажатием кнопки дозатора до второго упора (в случае прямого дозирования).

 

Проблемно-ситуационная задача

На центрифуге произошла авария, разбилась пробирка с кровью на исследование альбумина. Лаборант сразу открыл крышку центрифуги.

Задания

1.  Оцените  действия лаборанта. Какие меры безопасности необходимо соблюдать в сложившейся ситуации, перечислите ваши действия для ликвидации последствий аварии.

2.  Определите  концентрацию альбумина в сыворотке  крови бромкрезоловым зелёным (БКЗ) методом.

Эталон ответа

1.  Лаборант допустил ошибку, так  как нельзя сразу открывать  крышку центрифуги после аварии. Центрифугу можно открыть после 30 40 минут, т.к. за это время произойдет  осаждение аэрозолей.

Действия: центрифугу нужно выключить из сети, через 40 минут после полного оседания аэрозоля открыть крышку, кровь засыпать сухим, рекомендованным дезинфектантом и оставить в течение 1 часа.