Контрольная работа по "Микробиологии"

 

     Дифференциация  пастерелл, салмонелл и кишечной  палочки по биологическим свойствам.

     Лечение. В качестве специфического лечения используют гипериммунную противопастереллезную сыворотку. Лучший эффект получают при одновременном применении пастереллезной сыворотки с антибиотиками. Можно брать пенициллин, стрептомицин, дибиомицин, дитетрациклин, оримицин, биовитин-40 и биовит-80, окситетрациклин (террамицин), бициллин-5. Одновременно применяют сульфаниламидные препараты (норсульфазол, сульфазин, этазол, фталазол, сульфадимезин).

 

     Профилактика - полужидкая формолгидроокисьалюминиевая вакцина против пастереллеза КРС и буйволов; формолвакцина против пастереллеза овец, свиней; поливалентная формолвакцина против паратифа, пастереллеза и диплококковой септицемии поросят; масляная формолвакцина против пастереллеза КРС, буйволов и овец;  живая вакцина из инкапсулированных и неинкапсулированных культур Past. haemolytica, ассоциированные пастереллезно-борделлезные вакцины «Дессау» (Германия), «Солкоринителл» (Швейцария).

 

       Типизацию  проводят в РА и при помощи  стафилококкового теста (штамм № 7128) в чашках Петри с МПА. Установлена пригодность опсонофагоцитарной реакции для прижизненной диагностики пастереллеза. Опсонофагоцитарная способность сыворотки крови больных пастереллезом животных повышается уже в первые часы после инфицирования и остается на сравнительно высоком уровне в течение нескольких месяцев. Этой же реакцией можно устанавливать поствакцинальный иммунитет.

 

 

 

-4–

 

1. Межобластная ветеринарная лаборатория г. Калининграда  располагается на 2х этажах отдельно стоящего здания, построенного в 1989 году по типовому проекту. Площадь ветеринарной лаборатории: общая 499,1м², полезная 295,6 м².

Ветеринарная  лаборатория обеспечена централизованным холодным и горячим водоснабжением, отоплением и канализацией, имеются 2 отстойника.

Ветеринарная  лаборатория обеспечена вентиляцией приточно-вытяжной с механическим побуждением, установлены фильтры тонкой очистки в 3х вентиляционных системах: приточной, вытяжной и в вытяжной вентиляционной системе комнаты для зараженных животных.

Ветеринарная  лаборатория не газифицирована

Территория  ветеринарной лаборатории освещается, огорожена, на въезде оборудован шлагбаум, подъезды асфальтированы. В отсутствие персонала территория охраняется.

2. Помещения ветеринарной лаборатории разделены на «заразную» зону,где осуществляются манипуляции с ПБА2-4 группы патогенности и на «чистую» зону, где проводится работа с микроорганизмами. Зонирование между зонами соблюдается

Помещения 1 этажа, «чистая зона»:

гардеробная для сотрудников – 14,0 м²

кабинет заведующего  лабораторией – 13,0 м²

комната для  посетителей со звонком – 6,0 м²

вентиляционная  комната – 25 м²

«заразная зона»:

• комната регистрации и сортировки материала – 8,0 м²
• комната приема и регистрации патматериала с боксом для посевов – 20,5 м²
• комната вирусологических исследований с предбоксником – 7,5 м²
• комната с предбоксником для зараженных животных - 150 м²
• комната бактериологических исследований с предбоксником и боксом – 18,0 м²
• туалет – 3,0 м².

Помещеня  второго этажа, «чистая зона»:

• стерилизационная – 15,0 м²
• комната для приготовления питательных сред – 19,0 м²
• моечная – 9,0 м²
• комната приема пищи – 20,0 м²
• комната для работы с документами – 12,8 м²

«заразная зона»

• комната санитарно-пищевых исследований с боксом – 21,0 м²
• комната для ведения записей в рабочих журналах – 12,8 м²
• комната иммуноферментных исследований – 6,0 м²
• комната серологических исследований – 14,0 м²
• комната гематологических исследований – 12,8 м²
• комната химических исследований – 9,0 м²
• автоклавная для обеззараживания ПБА – 7,0 м²
• вентиляционна – 15,0 м²
• термостная комната – 9,0 м²
• комната для работы с приборами – 8,0 м²
• комната люминисцентной микроскопии – 5,6 м²
• комната паразитологических исследований – 9,0 м²

На границе между  зонами имеется санпропускник с  душевой.

Ветеринарная лаборатория имеет 3 отдельных входа, что позволяет соблюдать паточность движения  «заразного» материала и персонала.

На первом этаже в  комнате приемки проб лаборанты сортируют доставленный материал, укладывают в закрытые промаркированные контейнеры или боксы, на дно которых положена марлевая салфетка, пропитанная дезинфицирующим средством и переносят для исследования в «заразную» зону 1 или 2 этажа.

Предназначение  и аппаратное оснащение помещений  «заразной» зоны 1 этажа:

• две комнаты для приема, регистрации, сортировки материала – лабораторная мебель (столы, шкафы),бактерицидный облучатель, промаркированные биксы и подносы,4 холодильника
• автоклавная для обеззараживания ПБА – стерилизатор боковой вертикальный
• комната вирусологических исследований с предбоксником – лабораторные столы, бактерицидный облучатель, морозильная камера, холодильник, термостат, ламинарный бокс 2 класса биологической безопасности
• бокс для бак. посевов – лабораторные стол, шкаф, весы, бактерицидная лампа
• комната бактериологических исследований с предбоксником и боксом – лабораторные столы, шкафы, бактерицидная лампа, 3 термостата, 2 холодильника для хранения питательных сред, ламинарный бокс 2 класса биологической безопасности.
• Комната с пребоксником для зараженных животных – столы с сетками, шкафы.

 

Помещения «заразной» зоны 2 этажа

• комната гематологических исследований (исследование на лейкоз КРС с подсчетом лейкоцитов и выведением лейкоформулы, замеры радиационного фона с/х продуктов.кормов и пр.) – шкафы, столы, бактерицидный облучатель, холодильник, 2 микроскопа бинакулярных для микроскопии мазков крови подсчета лейкоцитов, камеры Горяева
• комната серологических исследований  (исследование  крови на бруцеллез, хламидиоз, асколизация шкур на сибирскую язву, сап лошадей, инфекционную анемиюлошадей, случную болезнь лошадей, листериоз)- шкафы, столы, бактерицидный облучатель, холодильник для хранения биопрепаратов, 1 термостат на 26°
• термостатная комната – лабораторная мебель (шкафы, столы), термомтат ТЭС – 1 на 37 °, 2 водяные бани ВБ-2, на 30 °С и 60 °С
• комната иммуноферментных  исследований (исследование на грипп птиц)– лабораторная мебель (шкафы, столы), бактерицидный облучатель, холодильник, АИФР-01, pH-метр
• комната санитарно-пищевых исследований с боксом (исследование продуктов с/х производства на пищевые токсикоинфекции. Органолептические и биохимические исследования мяса)- лабораторная мебель (шкафы, столы), бактерицидный облучатель, 2 холодильника для питательных сред, 2 термостата на 37 °С и 30 °С для инкубации посевов, иономер универсальный Эв – 74, электронные весы ACCULAB.
• автоклавная для обеззараживания ПБА – стерилизатор паровой вертикальный ВК – 75-01
• комната химических исследований (химические исследования крови, кормов. Мочи, биоматериала)- лабораторная мебель (шкафы, столы), бактерицидный облучатель, холодильник для хранения растворов химических реактивов, анализатор жидкости «Эксперт-001», анализатор молока вискозометрический «Сомотос-мини», анализатор качества молока « Клевер-1М», дельвотест, рефрактометр ИРФ-454, лабораторная зерновая мельница ЛЗМ-1, колориметр фотоэлектрический концентрационный КФК-2, электронные прецизионные весы ACCULAB, весы торсионные ВТ, вытяжной шкаф, магнитная мешалка ММ-5.
• комната паразитологических исследований (копровоскопия, микологические, арахноэнтомологические, протозоозные исследования) - лабораторная мебель (шкафы, столы). Бактерицидная лампа, центрифуга, вытяжной шкаф, 1 мкроскоп бинокулярный для микроскопии.
• комната для работы с приборами - лабораторная мебель (шкафы, столы), вытяжной шкаф ЗМ, центрифуга СМ – 6, весы лабораторные квадратные ВЛКТ – 500М, аппарат для встряхивания АВУ – 6 –С, мешалка магнитная ММ – 5
• комната люминисцентной микроскопии (микроскопические исследованияна бешенство)– лабораторный стол, люминисцентный микроскоп, бактерицидная лампа
• Комната для ведения записей в рабочих журналах – столы, шкафы, компьютер.

 

Помещения «чистой  » зоны 1 этажа:

• Гардеробная – 8 шкафов для хранения верхней и рабочей одежды сотрудников
• Кабинет заведующего – мебель, компьютер

Помещения «чистой» зоны 2 этажа

• Моечная – моечные ванны, столы, шкаф для посуды, бактерицидный облучатель
• Стерилизационная – 3 шкафа сушильно-стерилизационных ШШС-80П, 2 стерилизатора паровых вертикальных ВК-75-01, аквадистиллятор электрический ДЭ-25
• Комната для приготовления питательных сред – лабораторные столы, шкаф для хранения сухих сред, шкаф для хранения чистой посуды, 1 электронные весы, электрическая плита, бактерицидный облучатель.
• Комната для работы с документами - лабораторная мебель (шкафы, столы), компьютер
• Комтата приема пищи – холодильник, электрическая плита, микроволновая печь, кухонная мебель.

 

 

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ  ОТДЕЛ.

1 день.

Из доставленного патматериала от павшего теленка в возрасте 5 дней в цефановом пакетеделается посев на колибактериоз. Селезенку, печень, почку, костный мозг, лимфоузел, кровь пастеровской пипеткой посеяли на МПБ, МПА, чашки со средой Эндо. Костный мозг и кровь посеяли на среду Кода. Все органы посеяли на среду Киллиана (среда для накопления сальмонелл). Сделали мазки-отпечатки,которые окрасили по Граму. В мазке – Грамотрицательные палочки.

2 день.

Просмотр результатов  посевов на колибактериоз:

На МПА –   серые округлые колонии; на костном мозге роста нет

На МПБ –  помутнение

На среде  Эндо- малиновые, округлые колонии с  металлическим блеском.

Среда Кода стала  желтоватой.

Типичные колонии E.coli для постановки цветных рядов в МПБ и среду Симмонса. Через 4 часа делаем цветные ряды на среде Гисса с сахарами. Делаем пересевы с Кода на Эндо, с Киллиана на Плоскирева, с помутневших МПБ на Эндо.

3 день.

Чтение цветных  рядов с селезенки, печени:

Ряд Гисса:

Глюкоза +

Лактоза +

Манит +

Сахароза +

Мальтоза +

Сероводород –почернел  столбик среды Клиглера

Индол +

Симмонса – 

Цветной ряд  соответствует биохимическим свойствам E.coli.

С МПА сделан смыв для заражения белых мышей. Трех мышей заражают внутрибрюшинно, в дозе 0,5 мл

С МПБ сделана  подтитровка антибиотиков на среде  АГВ.

4 день.

Просмотр результатов  подтитровки антибиотиков. За время  нахождения чашки Петри в термостате произошел рост микробов. Степень  активности антибиотика определяется по размеру пространства вокруг дисков не занятого ростом микробов (зона задержки роста). Зону измеряют линейкой от края до края через центр диска.

Зона задержки роста:

До 15 мм – не чувствительны;15 мм – слабо чувствительны; 15-20 мм – средне чувствительны; более 25 мм высокочувствительны

Результаты:

Гентамицин  – 24

Норфлоксацин  – 22

Остальные устойчивы.

Мыши пали. Посев  патматериала от павших мышей на среду  Эндо.

5 день.

Посев патматериала на среду  Эндо дал блестящие, малиновые колонии.

 

ОТВЕТ: при бактериологическом и биологическом исследовании выделен  возбудитель колибактериоза.