Кинетические кривые роста микроорганизмов в закрытых системах

 

Тип газоанализатора - стационарный.

 Режим работы газоанализатора  - непрерывный. 

 Принцип работы газоанализатора  - электрохимический на О2 (твердый электролит, циркониевый датчик) и термокаталитический на СО.

 Способ забора пробы - принудительный.

 

ОПТИМА - стационарный прибор оптимизации  режимов горения

 

Предназначен для индикации  содержания кислорода в уходящих газах топливосжегающих установок, для сигнализации увеличения или уменьшения содержания кислорода относительно установленных значений, с целью достижения оптимального соотношения топливо - воздух, а также для сигнализации о появлении компонентов оксида углерода, суммы углеводородов.

 

Область применения: котельные, работающие на газовом топливе.

 

Тип прибора - стационарный.

 Режим работы - непрерывный.  Принцип работы - электрохимический  (твердоэлектролитный датчик).

АНКАТ-410 – стационарный многокомпонентный  газоанализатор промышленных выбросов

 

Предназначен для непрерывного экологического и технологического контроля топливосжигающих и технологических установок, измеряет концентрации О2, СО, СО2, NО, NО2, SО2, H2S, НCL, NН3, Cl2, а также для анализаторов отработавших газов (СО, NО, NОХ, SСН) тепловозов и других дизельных двигателей, кроме автомобильных и тракторных.

 

Область применения: топливосжигоющие и технологические установки предприятий энергетики, металлургической, стекольной, химической и нефтяной промышленностей, предприятия производители строительных материалов, железнодорожный транспорт.

 

Тип газоанализатора - стационарный.

 Метод измерения - электрохимический,  по каналам СО, SСН - оптикоабсорбционный.

 Режим работы - непрерывный или  циклический. 

Способ забора пробы - принудительный (от внешнего побудителя расхода, либо за счет избыточного давления).

 

АНКАТ-310 - переносной многокомпонентный  газоанализатор оптимизации режимов  горения

 

Газоанализатор АНКАТ-310 предназначен для проведения периодического измерения  параметров дымовых газов и температуры  при проведении регулировочных работ  по оптимизации режима горения различных  видов топлива (газ, уголь, мазут  и др.) в котельных установках малой и средней мощности (котлов, турбин, горелок).

 

Область применения: может быть использован  службами энергопредприятий; организациями, проводящими ремонт и наладку котельного оборудования; предприятиями, эксплуатирующими топливосжигающие установки, а также службами экологического и газового надзора.

 

Способ забора пробы - принудительный (встроенный побудитель расхода).

 Режим работы - периодический. 

 Принцип работы – электрохимический. 

 

АНКАТ-7670 - автоматический газоанализатор измерения уровня одоризации

 

Газоанализатор АНКАТ-7670 предназначен для измерения массовой концентрации меркаптанов (одоранта) в природном газе.

 

Область применения: контроль массовой концентрации меркаптанов (одоранта) в природном газе на газораспределительных станциях (ГРС) потребителям (на газопроводах давлением от 3 до 12 атм. ±10%, с расходом газа от 1000 до 200000 м3/ч).

 

Тип газоанализатора - стационарный.

 Метод измерения газоанализатора  - электрохимический. 

 Режим работы газоанализатора  - непрерывный. 

 Режим измерения газоанализатора  – циклический. 

 

ПИКП-Т - стационарный прибор контроля запыленности газовых потоков

 

Предназначен для непрерывного контроля качества работы фильтрующих устройств различного типа действия, а также для технологического и экологического мониторинга.

 

Область применения: непрерывный экологический  и технологический контроль содержания взвешенных частиц в газовых потоках  на предприятиях теплоэнергетической, металлургической, стекольной, химической, нефтехимической, пищевой промышленностей, при производстве строительных материалов и в других отраслях народного  хозяйства.

 

Принцип работы - трибоэлектрический.

 Режим работы - непрерывный.

 

 

 

 

 

 

 

120.транспозоны и их  использование  в конструировании  продуцентов.

 

Транспозон - последовательность  ДНК , способная реплицироваться и внедрять одну из копий в новое место генома .

 

 Транспозоны - это мобильные элементы, обычно имеющие длину около 2500-7000 н.п., представленные в геноме в основном семействами диспергированных повторов. От ИЭ они отличаются тем, что переносят так называемые "экзогенные гены", то есть, гены, кодирующие некоторые функции, не имеющие отношения к транспозиции. (Следует отметить, что термин "транспозон" в литературе иногда используется для обозначения любых транспозиционных элементов, включая ИЭ, ретротранспозоны и т.д.) Бактериальные транспозоны обозначаются буквами Tn, за которыми следует номер типа. Некоторые из них являются комплексными (или композиционными) транспозонами (complex or composite transposons), и называются так потому, что два отдельных ИЭ, каждый из которых способен к независимой транспозиции, фланкируют один или более "экзогенных гена". (Рис. 8.2б) Интересно то, что в композиционных транспозонах транспозиции может подвергаться не только весь комплекс в целом, но и один или оба фланговых ИЭ в отдельности. Поскольку транспозиционная активность кодируется в ИЭ, комплексные транспозоны обычно не содержат независимого гена транспозазы.

 

 Другие бактериальные транспозоны, так же как и многие эукариотические, фланкированы только короткими повторенными последовательностями различной ориентации и не содержат инсерционных элементов. Однако, не все транспозоны имеют симметричную структуру. У некоторых из них могут быть асимметричные концы, в которых отсутствуют либо прямые, либо инвертированные терминальные повторы (например, транспозон Tn554 из Staphilococcus aureus). Кодирующие участки некоторых транспозонов эукариот разделены интронами (например, P-элемент Drosophila).

 

 Некоторые бактериофаги фактически  являются транспозонами или транспозиционными бактериофагами (transposing bacteriophages). Например, бактериофаг Mu является очень большим транспозоном (*38000 н.п.), который кодирует не только ферменты, ответственные за транспозицию, но также и большое число структурных белков, необходимых для упаковки его ДНК.

 

 Транспозоны различных типов довольно широко распространены в геномах животных, растений и грибов. Например, Drosophila melanogaster содержит множественные копии 50-100 разновидностей транспозонов

 

Транспозоновый Tn5-mob -мутагенез позволяет маркировать крупные плазмиды грамотрицательных бактерий в разных локусах и придавать им способность к мобилизации на перенос в клетки E.coli. В клетках кишечной палочки эти плазмиды не поддерживаются. Встроив в состав транспозона Tn5-mob плазмидный ориджин репликации, функциональный только в энтеробакте-риях и способный поддерживать ограниченные по размеру плазмиды, планирует-ся получить инструмент для “клонирования in vivo” участков ДНК мегаплазмид.

 

Модификации подвергали транспозон Tn5-B12S, находящийся в векторе-самоубийце для транспозонового мутагенеза pMH1701(1). Кассету npt1-sacB-sacR вырезали из транспозона по BamH1-сайту и на ее место встраивали Kmr-производную энтеробактериального плазмидного репликона p15A. Производную получали следующим образом. Космиду pSUP106 cо встроенной в BamH1-сайт кассетой npt1-sacB-sacR гидролизовали рестриктазой EcoR1. Малый фрагмент c находящимися в его составе ориджином репликации p15A и геном npt1 циклизо-вали с использованием ДНК-лигазы. Лигазной смесью трансформировали клетки E.coli HB101 с отбором на Kmr. Из клеток трансформантов выделяли плазмиду с уникальным сайтом рестрикции BamH1, необходимым для последующего клонирования. Эта плазмида встраивалась в состав транспозона вместо удаленной кассеты и полученная конструкция вводилась трансформацией в клетки кишечной палочки. В клетках E.coli она реплицируется с векторного ориджина репликации ColE1-типа как с более высококопийного; количественный выход плазмидной ДНК у трансформантов таков же, как у клеток с исходным вектором pMH1701. Стабильность поддержания, а также размер полученной плазмиды с транспозоном Tn5-mob-ori, сравнимы с плазмидой pMH1701.

 

Подвижные генетические элементы: транспозоны, Is-последовательности. Их строение, функции и роль в эволюции бактерий.

Мигрирующие генетические элементы - отдельные участки ДНК, способные определять свой перенос между хромосомами или хромосомой и плазмидой с помощью фермента рекомбинации транспозазы. Простейшим их типом являются инсерционные последовательности (IS- элементы) или вставочные элементы. IS-последовательности – это короткие фрагменты ДНК. Они не несут структурных (кодирующих белок) генов, а содержат только гены, ответственные за транспозицию (способность перемещаться по хромосоме и встраиваться в различные ее участки).Их функции- координация взаимодействия плазмид, умеренных фагов, транспозонов и генофора для обеспечения репродукции, регуляция активности генов, индукция мутаций. Транспозоны – это более крупные молекулы ДНК. Помимо генов, ответственных за транспозицию, они содержат и структурный ген, обеспечивающий синтез молекул, обладающих специфическим биологическим свойством, например токсичностью, или обеспечивающих устойчивость к антибиотикам. Транспозоны способны перемещаться по хромосоме. Их положение сказывается на экспрессии генов. Транспозоны могут существовать и вне хромосомы (автономно), но неспособны к автономной репликации.  Перемещаясь по репликону или между репликонами, подвижные генетические элементы вызывают: 1. Инактивацию генов тех участков ДНК, куда они, переместившись, встраиваются. 2. Образование повреждений генетического материала.

3. Слияние репликонов, т. е. встраивание плазмиды в хромосому. 4. Распространение генов в популяции бактерий, что может приводить к изменению биологических свойств популяции, смене возбудителей инфекционных заболеваний, а также способствует эволюционным процессам среди микробов

 

150.Иммобилизация ферментов  путем включения в гель.

 

Иммобилизованными ферментами называются ферменты, искусственно связанные с  нерастворимым носителем, но сохраняющие  свои каталитические свойства.

 

 Еще в 1916 г. Дж. Нельсон  и Е. Гриффин показали, что сахароза, сорбированная на угле, сохраняла свою каталитическую активность, но лишь в 1953 г. Н. Грубхофер и Д. Шлейт впервые осуществили ковалентные связывания амилазы, пепсина, РНКазы и карбоксипептидазы с нерастворимым носителем.

 

 В 1971 г. на первой конференции  по инженерной энзимологии был  узаконен термин «иммобилизованные  ферменты». Однако в понятие  «иммобилизация» в настоящее  время вкладывают более широкий  смысл, чем связывание на нерастворимом  носителе, а именно - полное или  частичное ограничение свободы  движения белковых молекул.

 

 Иммобилизованные ферменты  имеют ряд преимуществ в сравнении со свободными молекулами. Прежде всего, такие ферменты, представляя собой гетерогенные катализаторы, легко отделяются от реакционной среды, могут использоваться многократно и обеспечивают непрерывность каталитического процесса. Кроме того, иммобилизация ведет к изменению свойств фермента: суб­стратной специфичности, устойчивости, зависимости активности от параметров среды. Иммобилизованные ферменты долговечны и в тысячи и десятки тысяч раз стабильнее свободных энзимов. Так, происходящая при температуре 65 °С термоинактивация лактатдегидрогеназы, иммобилизованной в 60 %-м полиакриламидном геле, замедлена в 3600 раз по сравнению с нативным ферментом. Все перечисленное обеспечивает высокую экономичность, эффектив-ность и конкурентоспособность технологий, использующих иммобилизованные ферменты.

 

Иммобилизация ферментов путем  включения в гель. Способ иммобили-зации ферментов путем включения в трехмерную структуру полимерного геля широко распространен благодаря своей простоте и уникальности. Метод применим для иммобилизации не только индивидуальных ферментов, но и мультиэнзимных комплексов и даже интактных клеток. Иммобилизацию ферментов в геле осуществляют двумя способами. В первом случае фермент вводят в водный раствор мономера, а затем проводят полимеризацию, в результате которой возникает пространственная структура полимерного геля с включенными в его ячейки молекулами фермента. Во втором случае фермент вносят в раствор уже готового полимера, который впоследствии переводят в гелеобразное состояние. Для первого варианта используют гели полиакриламида, поли-винилового спирта, поливинилпирролидона, силикагеля, для второго - гели крахмала, агар-агара, каррагинана, агарозы, фосфата кальция.

 

 Иммобилизация ферментов в  гелях обеспечивает равномерное  распределение энзима в объеме  носителя. Большинство гелевых матриц обладает высокой механической, химической, тепловой и биологической стойкостью и обеспечивает возможность многократного использования фермента, включенного в его структуру. Однако метод непригоден для иммобилизации ферментов, действующих на водонерастворимые субстраты.

 

197.мультиферментные комплексы.

В мультиферментном комплексе несколько ферментов связаны между собой в единый комплекс и осуществляют ряд последовательных реакций, в которых продукт реакции непосредственно передается на следующий фермент и является только его субстратом. Благодаря таким комплексам значительно ускоряется скорость превращения молекул.